ADAR1 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-425147-NIC

마우스 Adar 유전자는 이중가닥 RNA 구조 내에서 A-to-I(아데노신→이노신) 편집을 촉매하는 RNA 작용 아데노신 탈아미노화효소인 ADAR1을 암호화하며, 이를 통해 전사체 서열, 스플라이싱 양상, RNA 안정성을 재구성한다. ADAR1은 내인성 dsRNA가 비정상적으로 인식되는 것을 제한하고, 인터페론 자극 유전자(ISG) 프로그램과 MDA5/MAVS 같은 RNA 감지 경로에 영향을 주어 선천면역 항상성의 핵심 조절자로 작용한다. 이러한 기능을 통해 전사 후 조절, 스트레스 반응, 면역원성 핵산의 제어에 기여하며, 신경발달, 염증 연관 표현형, 종양 면역 신호전달 연구에서 중요한 표적이 된다. ADAR1 활성과 RNA 편집 지형의 변화는 실험 모델에서 조절 이상 RNA 대사 및 면역 활성화를 나타내는 분자적 지표로 널리 활용된다.

ADAR1 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Adar 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Adar 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Adar의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Adar 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.