ADAM8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418993
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADAM8 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ADAM8, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAM8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418993 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adam8 codifica uma metaloprotease-desintegrina transmembranar (ADAM8) que medeia o shedding do ectodomínio e interações célula–célula ou célula–matriz, integrando a proteólise com a sinalização de adesão. Em compartimentos imunes e estromais de camundongos, a ADAM8 contribui para a sinalização inflamatória, o recrutamento de leucócitos e a remodelação tecidual por meio da regulação de receptores de superfície e da disponibilidade de citocinas/quimiocinas. Sua atividade se cruza com vias associadas às saídas de sinalização de MAPK e NF-κB ao modular a ativação de receptores e sinais do microambiente extracelular. A expressão desregulada de Adam8 tem sido associada à inflamação crônica, fibrose e processos relacionados a tumores, como invasão e remodelação do nicho metastático, tornando-o relevante para estudos mecanísticos em modelos de doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ADAM8 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adam8 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adam8, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adam8 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ADAM8.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adam8 para a investigação da sinalização de ADAM8, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adam8 críticos para a função ADAM8
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adam8 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ADAM8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ADAM8 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adam8. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ADAM8 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ADAM8 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adam8 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adam8 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.