ADAM7 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m2): sc-418992-KO-2

Panoramica

Adam7 codifica ADAM7, un membro cataliticamente inattivo della famiglia ADAM (a disintegrin and metalloprotease) che funge da modulatore di adesione e segnalazione associato alla membrana, piuttosto che da proteasi. Nel topo, ADAM7 è arricchito nel tratto riproduttivo maschile e partecipa alla maturazione degli spermatozoi e alle interazioni spermatozoo–ovocita attraverso interazioni proteina–proteina e il coordinamento di complessi recettoriali sulla superficie cellulare. Contribuisce all’organizzazione della membrana e ai processi di comunicazione cellula–cellula che si intrecciano con vie che regolano le interazioni con la matrice extracellulare e la dinamica dell’adesione cellulare. La disregolazione dei membri della famiglia ADAM è ampiamente associata ad alterazioni del rimodellamento tissutale e della segnalazione infiammatoria, rendendo Adam7 un locus utile per studi meccanicistici della biologia riproduttiva e delle reti di segnalazione della superficie cellulare.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ADAM7 (m2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Adam7 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Adam7 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Adam7 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ADAM7.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Adam7 per lo studio della segnalazione di ADAM7, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Adam7 critici per la funzione di ADAM7
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Adam7 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ADAM7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal ADAM7 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Adam7. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ADAM7 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR ADAM7 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Adam7 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Adam7 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.