ADAM22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418988
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ADAM22 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ADAM22, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ADAM22 Anticorpo (C-2): sc-373931
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ADAM22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418988 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Adam22 codifica a ADAM22, uma proteína transmembranar da família ADAM, cataliticamente inativa, enriquecida no sistema nervoso, que atua como componente de adesão/andaime nas sinapses. A ADAM22 forma complexos com a LGI1 e com receptores pós-sinápticos para regular a transmissão glutamatérgica, a maturação sináptica e a excitabilidade neuronal, influenciando a organização das espinhas dendríticas e a estabilidade dos circuitos. Por meio dessas interações, a ADAM22 impacta vias de sinalização sináptica e a plasticidade dependente de atividade, que são centrais para o neurodesenvolvimento e a homeostase das redes neurais. A desregulação do eixo ADAM22–LGI1 tem sido associada à suscetibilidade a convulsões e a fenótipos do neurodesenvolvimento, tornando Adam22 um alvo útil para estudos mecanísticos de disfunção sináptica em modelos relevantes para doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ADAM22 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Adam22 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Adam22, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Adam22 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ADAM22.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Adam22 para a investigação da sinalização de ADAM22, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Adam22 críticos para a função ADAM22
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Adam22 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ADAM22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ADAM22 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Adam22. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ADAM22 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ADAM22 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Adam22 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Adam22 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.