Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-418974
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ACTR-I O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ACTR-I, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ACTR-I Anticorpo (C-5): sc-374523
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-418974 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Acvr1 codifica o receptor de activina A tipo I (ACTR-I/ALK2), um receptor quinase de serina/treonina do tipo I da superfamília TGF-β que transmite sinais de ligantes de BMP e activina para as vias a jusante SMAD1/5/8 e para programas de transcrição dependentes de SMAD. Em células de camundongo, o ACTR-I contribui para a regulação do padrão de desenvolvimento, da diferenciação osteogênica e condrogênica e da homeostase tecidual ao integrar a sinalização do complexo receptor com reguladores de feedback dependentes do contexto. A perturbação da via de ACVR1 está associada à desregulação da sinalização de BMP e a decisões aberrantes de destino celular, tornando-a relevante para estudos de biologia esquelética, remodelamento tipo fibrose e crosstalk de transdução de sinal com as vias MAPK e PI3K/AKT. A investigação experimental da função de Acvr1 dá suporte a trabalhos mecanísticos sobre a atividade quinase do receptor, a especificidade por ligantes e redes transcricionais a jusante em contextos fisiológicos e de modelos de doença.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACTR-I (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acvr1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acvr1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acvr1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACTR-I.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acvr1 para a investigação da sinalização de ACTR-I, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acvr1 críticos para a função ACTR-I
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acvr1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACTR-I Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acvr1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ACTR-I Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACTR-I (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acvr1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acvr1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.