ACTL7B CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418970

개요

Actl7b는 정소에 풍부하게 발현되는 액틴 유사 단백질 ACTL7B를 암호화하며, 정자세포(spermatid) 분화와 정자 형태형성 과정에서 세포골격 재구성에 관여하는 것으로 알려져 있습니다. 액틴 계열 단백질로서 ACTL7B는 첨체–핵 복합체의 형태를 잡는 과정과, 운동성 및 수정 능력에 필요한 미세섬유(마이크로필라멘트) 의존적 구조의 조직화를 지지하는 과정과 연관됩니다. 생식세포에서 액틴 역학이 교란되면 비정상적인 정자 머리 형성, 정자 기능 저하, 그리고 수컷의 생식력 저하(부분 불임) 표현형과 관련되는 것으로 보고되어 왔습니다. 따라서 Actl7b는 마우스 모델에서 세포골격 조절, 정자형성(spermiogenesis), 그리고 생식 적합도를 좌우하는 유전자 네트워크를 연구하기 위한 유용한 출발점이 됩니다.

ACTL7B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Actl7b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Actl7b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Actl7b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ACTL7B 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ACTL7B 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Actl7b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ACTL7B 기능에 중요한 Actl7b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Actl7b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ACTL7B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ACTL7B CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Actl7b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ACTL7B HDR 플라스미드 (m) 및 ACTL7B HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Actl7b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Actl7b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.