ACTG1 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400006-NIC

ACTG1은 세포 형태, 피질 장력, 그리고 힘 생성에 기여하는 액틴 세포골격의 핵심 구성 요소인 세포질 액틴 감마 1을 암호화합니다. ACTG1은 세포 이동, 부착, 세포질분열, 기계적 신호전달(mechanotransduction)과 같은 과정의 기반이 되는 액틴 필라멘트의 중합 및 재구성에 관여하며, Rho 계열 GTPase 신호와 다양한 액틴 결합 단백질 네트워크와 통합적으로 작동합니다. 인간 생물학에서 ACTG1 의존적 세포골격 역학이 교란되면 세포 내 수송과 세포 구조가 변화할 수 있어, 조직 발달과 스트레스 반응 연구에서 중요한 표적이 됩니다. ACTG1에 영향을 주는 유전적 변이 또는 발현 조절 이상은 세포골격 연관 표현형과 관련되어 왔으며, 그 예로 특정 형태의 감각신경성 난청과 세포 운동성 및 구조 변화가 동반되는 질환들이 보고되어 있습니다.

ACTG1 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ACTG1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ACTG1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ACTG1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ACTG1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.