ACTG1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418967

개요

Actg1는 세포질 γ-액틴(ACTG1)을 암호화하며, 이는 고도로 보존된 액틴 아이소폼으로 중합되어 미세필라멘트를 형성함으로써 세포 형태, 접착, 기계적 안정성을 지지합니다. ACTG1의 동적 변화는 세포질분열, 세포 이동, 소포 수송과 같은 과정에서 액틴 재구성을 조율하고, Rho 계열 GTPase 의존성 네트워크를 포함해 세포골격의 턴오버를 조절하는 신호전달 경로와 통합됩니다. 마우스 세포에서 Actg1는 피질 장력과 액토미오신 조직을 조절함으로써 조직 형태형성과 유지, 그리고 상피 및 간엽 구조의 아키텍처 유지에 기여합니다. 조절되지 않은 액틴 항상성과 변화된 ACTG1 기능은 발달 표현형, 기계적 신호전달(mechanotransduction), 그리고 세포 운동성과 장벽 특성에 영향을 주는 질병 연관 세포골격 기능 이상에 대한 연구에서 중요한 의미를 갖습니다.

ACTG1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Actg1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Actg1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Actg1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ACTG1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ACTG1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Actg1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ACTG1 기능에 중요한 Actg1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Actg1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ACTG1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ACTG1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Actg1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ACTG1 HDR 플라스미드 (m) 및 ACTG1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Actg1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Actg1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.