ACTG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400006

Visão geral

ACTG1 codifica a gama-actina citoplasmática, uma isoforma de actina altamente conservada que polimeriza em microfilamentos para sustentar a forma celular, a tensão cortical e a estabilidade mecânica. A dinâmica de actina impulsionada por ACTG1 coordena processos-chave, incluindo migração celular, citocinese, tráfego de membranas e formação de junções aderentes, integrando-se a vias reguladoras da actina, como a sinalização por GTPases da família Rho e redes de proteínas ligantes de actina. Na biologia humana, alterações na função de ACTG1 e na homeostase do citoesqueleto de actina estão associadas a defeitos em sistemas sensoriais e de desenvolvimento, e são frequentemente estudadas no contexto da remodelação do citoesqueleto em respostas ao estresse e na morfogênese tecidual. Como a arquitetura da actina influencia programas transcricionais e a mecanotransdução, ACTG1 também é relevante para investigações de transições de estado celular e de sinalização dependente do citoesqueleto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACTG1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ACTG1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ACTG1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ACTG1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACTG1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ACTG1 para a investigação da sinalização de ACTG1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ACTG1 críticos para a função ACTG1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ACTG1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ACTG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ACTG1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ACTG1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ACTG1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ACTG1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ACTG1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ACTG1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.