ACSVL6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405327

概要

SLC27A5は、ヒトの超長鎖アシルCoA合成酵素ファミリーのメンバー6（ACSVL6）をコードしており、長鎖脂肪酸をアシルCoAチオエステルへ変換して活性化する酵素です。この反応は、脂質の取り込みや細胞内輸送を介してミトコンドリアおよびペルオキシソームでのβ酸化を支えるとともに、トリグリセリド、リン脂質、胆汁酸関連の脂質リモデリングに必要なアシルCoA基質も供給します。これらの役割を通じて、ACSVL6は代謝恒常性の維持に寄与し、エネルギーバランス、膜組成、脂質シグナル伝達を制御する経路と交差します。脂肪酸の活性化異常およびそれに続く脂質フラックスの変化は、代謝機能障害や肝臓関連の表現型にしばしば関与することから、SLC27A5は脂質代謝の機序研究に有用な標的となります。

ACSVL6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC27A5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC27A5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC27A5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ACSVL6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ACSVL6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC27A5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ACSVL6の機能に不可欠なSLC27A5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC27A5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ACSVL6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびACSVL6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC27A5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ACSVL6 HDRプラスミド（h）および ACSVL6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC27A5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC27A5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。