ACO2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-404434-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- ACO2 Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- ACO2 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 ACO2 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 ACO2을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 ACO2 Antibody (775F2I): sc-517651
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
ACO2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-404434-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACO2 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-404434-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACO2는 TCA(트라이카복실산) 회로에서 시트르산을 아이소시트르산으로 가역적으로 이성질화하는 반응을 촉매하는, [4Fe–4S] 철–황 효소인 미토콘드리아 아코니타아제 2를 암호화한다. ACO2는 산화적 대사, NADH 생성, 미토콘드리아 ATP 생산을 뒷받침함으로써 레독스 항상성과 세포의 생물에너지 생성 능력에 기여한다. ACO2 활성은 철–황 클러스터의 무결성을 통해 미토콘드리아 스트레스 반응 및 활성산소종(ROS)에 대한 민감성과 연관된다. ACO2 기능의 변화는 대사 이상 및 미토콘드리아 질환 표현형과 관련되어 있어, 암과 신경퇴행 모델에서 생물에너지 재배선(bioenergetic rewiring)을 연구하는 데 유용한 표적이 된다.
ACO2 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ACO2 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ACO2 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ACO2의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ACO2 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.