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ACE2慢病毒激活颗粒(h) | sc-401131-LAC | 200 µl | $455.00 |
血管紧张素转化酶2(ACE2)是一种依赖锌的羧肽酶,可通过将血管紧张素II转化为血管紧张素-(1–7)来拮抗肾素–血管紧张素系统,从而调节血管调控、炎症及纤维化相关信号通路。人ACE2表达于上皮与内皮细胞表面,并影响包括MAS受体信号、氧化应激反应以及细胞因子相关程序等通路,从而维持组织稳态。ACE2表达或活性失衡与心肺和肾脏病理生理、代谢性炎症及组织重塑过程有关。ACE2同时也是病毒进入细胞过程中的关键宿主因子,因此成为研究受体介导内吞以及相关细胞类型中下游先天免疫信号的重要枢纽。
ACE2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ACE2 表达。
ACE2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ACE2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ACE2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ACE2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。