CRISPR 데이터가 아님: 이 이미지는 CRISPR 실험 결과를 시각화하기 위한 항체 품질을 보여줍니다.
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ACCα 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-401102-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- ACCα Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- ACCα 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 ACCα 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 ACACA을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
- Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 ACCα Antibody (D-5): sc-137104
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
ACCα 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-401102-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ACCα 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-401102-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ACACA는 비오틴 의존성 효소인 아세틸‑CoA 카복실화효소 알파(ACCα)를 암호화하며, 이 효소는 ATP 의존적으로 아세틸‑CoA를 말로닐‑CoA로 전환하는 반응을 촉매합니다. 이는 de novo 지방산 합성에서 사실상 되돌릴 수 없는(커밋된) 단계입니다. ACCα는 말로닐‑CoA 수준을 조절함으로써 지질 동화(anabolic) 대사 플럭스를 조율하고, CPT1 억제를 통해 미토콘드리아 지방산 β‑산화를 간접적으로 조절하여 영양 상태를 에너지 항상성과 연결합니다. ACCα 활성은 AMPK 신호전달 및 지질 반응성 전사 프로그램과 통합되어 막 생합성, 지질방울(lipid droplet) 형성, 그리고 아세틸‑CoA의 분배를 형성합니다. ACACA의 발현 또는 활성이 비정상적으로 조절될 경우 대사 질환의 표현형 및 암세포 대사에서 지질 의존적 취약성과 연관되는 것으로 보고되어, 대사 재배선(metabolic rewiring)과 지방생합성 연구에서 활용 가치가 뒷받침됩니다.
ACCα 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 ACACA 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 ACACA 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 ACACA의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, ACACA 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.