ACBD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428356

Visão geral

Acbd6 codifica a proteína contendo o domínio de ligação a acil-CoA 6 (ACBD6), uma proteína citosólica de ligação a lipídios que se associa a ésteres de acil-CoA de cadeia longa e ajuda a coordenar o manejo intracelular de acil-CoA. Ao tamponar e apresentar ácidos graxos ativados a enzimas a jusante, a ACBD6 está posicionada para influenciar o fluxo do metabolismo lipídico, o remodelamento de lipídios de membrana e processos dependentes de acilação que conectam o estado nutricional à função celular. A perturbação da disponibilidade de acil-CoA pode afetar o metabolismo mitocondrial, as respostas ao estresse oxidativo e a sinalização inflamatória, tornando o Acbd6 relevante para estudos de desregulação metabólica e de fenótipos celulares impulsionados por lipídios. Assim, a ACBD6 de camundongo é um ponto de partida útil para dissecar vias reguladas por acil-CoA em tecidos com alta renovação lipídica, incluindo fígado, tecido adiposo e células imunes.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ACBD6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Acbd6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Acbd6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Acbd6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ACBD6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Acbd6 para a investigação da sinalização de ACBD6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Acbd6 críticos para a função ACBD6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Acbd6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo ACBD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ACBD6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Acbd6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo ACBD6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ACBD6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Acbd6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Acbd6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.