ABHD12 Double Nickaseプラスミド (h): sc-405543-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- ABHD12 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- ABHD12ダブルニカースプラスミド（h）およびABHD12ダブルニカースプラスミド（h2）は、ABHD12を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
ABHD12 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-405543-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABHD12 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-405543-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD12（abhydrolase domain containing 12）は、膜関連型のセリンヒドロラーゼをコードしており、生理活性をもつリゾリン脂質や関連するグリセロリン脂質代謝産物を加水分解することで脂質シグナル伝達を調節します。リゾホスファチジルセリンおよびその下流にあるエンドカンナビノイド系・神経免疫系に関連した脂質ネットワークを制御することを通じて、ABHD12は中枢神経系におけるミクログリアの機能、炎症の基調（炎症トーン）、および膜恒常性に影響を与えます。ABHD12活性の変動は脂質組成とシグナル経路を変化させ、酸化ストレス応答やシナプス維持と交差する経路にも影響します。ヒトABHD12の機能喪失変異は神経変性疾患PHARCと関連しており、脂質代謝および神経炎症の研究における重要性を裏付けています。
ABHD12 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における ABHD12 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、ABHD12内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、ABHD12の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、ABHD12が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。