Plasmide Double Nickase (m) 5330417C22Rik: sc-432895-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) 5330417C22Rik correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide 5330417C22Rik Double Nickase (m) et le plasmide 5330417C22Rik Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant 5330417C22Rik. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) 5330417C22Rik | sc-432895-NIC | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin 5330417C22Rik code une protéine encore mal caractérisée, avec une annotation fonctionnelle limitée, et est souvent étudié comme un cadre de lecture ouvert/transcrit non caractérisé dans des criblages à l’échelle du génome et des jeux de données développementaux. Les données disponibles suggèrent qu’il pourrait contribuer à l’homéostasie cellulaire de base via des rôles encore à définir dans la régulation des gènes ou des processus associés à l’ARN, comme l’indiquent les profils d’expression et les réseaux de co‑expression. Comme sa fonction moléculaire et son intégration dans des voies biologiques restent non résolues, 5330417C22Rik est fréquemment étudié pour relier génotype et phénotype et attribuer une fonction à de nouveaux loci. Des études de perturbation peuvent aider à clarifier d’éventuels liens avec la biologie spécifique de certains tissus et des phénotypes pertinents pour la maladie dans des modèles murins, sans présumer d’un rôle clinique.
5330417C22Rik Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus 5330417C22Rik dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de 5330417C22Rik. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de 5330417C22Rik. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de 5330417C22Rik.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.