20S Proteasome β2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403536

개요

PSMB2는 인간 20S 프로테아좀 코어 입자의 β2 촉매 소단위를 암호화하며, 이는 ATP 의존적 단백질 턴오버와 항원 가공을 조절하는 유비퀴틴–프로테아좀 시스템의 핵심 구성요소이다. 26S 프로테아좀의 일부로서 20S β2는 폴리유비퀴틴화된 기질의 단백질분해적 절단에 기여하여 단백질 항상성, 세포주기 진행, 스트레스 반응, 그리고 핵심 조절자들의 조절된 분해를 통해 NF-κB와 같은 신호전달 경로에 영향을 준다. 프로테아좀 활성은 MHC class I 제시를 위한 펩타이드를 생성함으로써 면역 감시에 영향을 미치며, DNA 손상 및 세포사멸 경로에 관여하는 단백질들의 안정성에도 영향을 준다. 조절 이상이 있는 프로테아좀 기능과 변화된 프로테아좀 소단위 발현은 암 생물학, 염증성 신호전달, 신경퇴행성 단백질 응집 표현형과 관련된 것으로 알려져 있어, PSMB2는 단백질 항상성과 세포 적응의 기전을 연구하는 데 유용한 표적이 된다.

20S Proteasome β2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 PSMB2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 PSMB2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 PSMB2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 20S Proteasome β2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 20S Proteasome β2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 PSMB2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• 20S Proteasome β2 기능에 중요한 PSMB2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 PSMB2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• 20S Proteasome β2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 20S Proteasome β2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 PSMB2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  20S Proteasome β2 HDR 플라스미드 (h) 및 20S Proteasome β2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 PSMB2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 PSMB2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.