γS-crystallin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419834

개요

Crygs는 생쥐의 γS-크리스탈린을 암호화하며, 이는 안구 수정체 세포질에 매우 풍부하게 존재하는 구조 단백질로서, 조밀하게 밀집된 단백질 집합체를 안정화함으로써 수정체의 투명성과 굴절 특성에 기여합니다. β/γ-크리스탈린 슈퍼패밀리의 일원인 γS-크리스탈린은 핵이 없는 환경에서 장기적인 단백질 항상성 유지를 돕는데, 이때 접힘 변화, 응집, 또는 번역 후 변형이 발생하면 수정체의 빛 전달이 저해될 수 있습니다. 크리스탈린 균형의 붕괴는 샤페론 보조 접힘과 단백질 용해도에 평생 영향을 미치는 스트레스 반응을 포함한 단백질 항상성(프로테오스타시스) 경로와 맞물려 있습니다. 크리스탈린의 유전적·생화학적 교란은 수정체 혼탁(불투명) 표현형을 모델링하고 백내장 관련 단백질 응집의 기저 기전을 연구하는 데 널리 활용됩니다.

γS-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Crygs 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Crygs 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Crygs의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 γS-crystallin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 γS-crystallin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Crygs 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• γS-crystallin 기능에 중요한 Crygs 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Crygs 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• γS-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 γS-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Crygs 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  γS-crystallin HDR 플라스미드 (m) 및 γS-crystallin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Crygs 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Crygs 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.