Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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γ-GCSc Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401133-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- γ-GCScO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase γ-GCSc (h) e o Plasmídeo Double Nickase γ-GCSc (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GCLC. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:γ-GCSc Anticorpo (H-5): sc-390811
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
γ-GCSc Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401133-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
γ-GCSc Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401133-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GCLC codifica a subunidade catalítica da ligase glutamato–cisteína (γ-GCSc), a enzima limitante da velocidade na biossíntese de glutationa que catalisa a formação de γ-glutamilcisteína. Ao controlar os estoques celulares de glutationa, a γ-GCSc sustenta a homeostase redox, a detoxificação de eletrófilos e a manutenção da capacidade antioxidante mitocondrial e citosólica, com efeitos a jusante sobre a sinalização sensível a ROS e a adaptação metabólica. A atividade de GCLC é rigidamente regulada em vias de resposta ao estresse oxidativo, incluindo programas transcricionais mediados por NRF2/KEAP1, e influencia a suscetibilidade à ferroptose e a outros mecanismos de morte celular induzidos por estresse. A desregulação do metabolismo de glutationa dependente de GCLC tem sido associada a respostas alteradas ao estresse oxidativo e a xenobióticos em contextos como doença hepática, neurodegeneração e biologia do câncer.
γ-GCSc O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GCLC em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GCLC. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GCLC. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GCLC interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.