γF-crystallin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419833

개요

Crygf는 마우스 안구 수정체에서 매우 풍부하게 존재하는 구조적 크리스탈린인 γF-크리스탈린을 암호화하며, 이는 굴절률 유지, 투명성, 그리고 섬유세포의 장기적 안정성을 뒷받침합니다. γ-크리스탈린은 빽빽하게 포장된 β-시트 도메인이 특징으로, 빛 산란을 최소화하면서 높은 단백질 밀도를 가능하게 합니다. 또한 이들의 유지는 샤페론과의 상호작용, 산화환원 균형, 제한적인 단백질 turnover를 포함한 수정체 단백질 항상성(proteostasis) 네트워크에 의존합니다. 크리스탈린의 조성이나 용해도가 교란되면 수정체 구조가 무너지고 단백질 응집이 촉진되며, 실험 모델에서 백내장 유사 혼탁 표현형에 대한 감수성이 증가할 수 있습니다. 따라서 Crygf는 대체로 분열하지 않는(post-mitotic) 조직 환경에서 수정체 발달, 섬유세포 분화, 그리고 단백질 안정성 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 지점으로 활용됩니다.

γF-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Crygf 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Crygf 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Crygf의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 γF-crystallin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 γF-crystallin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Crygf 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• γF-crystallin 기능에 중요한 Crygf 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Crygf 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• γF-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 γF-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Crygf 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  γF-crystallin HDR 플라스미드 (m) 및 γF-crystallin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Crygf 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Crygf 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.