βB3-crystallin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419827

개요

Crybb3는 수정체 섬유세포의 구조, 장거리 질서(long-range order), 그리고 투명성 유지에 기여하는 구조 단백질인 β/γ-크리스탈린 계열의 βB3-크리스탈린을 암호화합니다. βB3-크리스탈린은 크리스탈린 복합체 조립에 관여하며, 수정체의 발달과 성숙 과정에서 단백질 안정성과 굴절 특성을 지지합니다. 크리스탈린 항상성이 깨지면 단백질 응집, 산화환원(redox) 균형 변화, 그리고 수정체의 빛 산란이 촉진될 수 있어, Crybb3는 수정체에서 단백질 항상성(proteostasis)과 세포 스트레스 반응을 조절하는 경로와 연관됩니다. 마우스 모델에서는 크리스탈린 조성의 교란이 흔히 수정체 퇴행 및 백내장 유사 표현형과 관련된 맥락에서 연구됩니다.

βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Crybb3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Crybb3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Crybb3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 βB3-crystallin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 βB3-crystallin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Crybb3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• βB3-crystallin 기능에 중요한 Crybb3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Crybb3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 βB3-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Crybb3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  βB3-crystallin HDR 플라스미드 (m) 및 βB3-crystallin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Crybb3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Crybb3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.