Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
β2C Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400056
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- β2C Tubulin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico β2C Tubulin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:β2C Tubulin Anticorpo (1A9): sc-134230
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
β2C Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400056 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
TUBB4B codifica a tubulina β2C, um componente central dos heterodímeros de α/β-tubulina que polimerizam em microtúbulos para sustentar a arquitetura do citoesqueleto, o transporte intracelular e a montagem do fuso mitótico. A remodelação dinâmica dos microtúbulos está na base de processos como a progressão do ciclo celular, o posicionamento de organelos e a ciliogénese, e interage com vias que regulam a polaridade e as respostas ao stress. Alterações no equilíbrio entre isotipos de tubulina e na dinâmica dos microtúbulos são frequentemente associadas a fenótipos proliferativos, instabilidade cromossómica e mudanças no comportamento migratório observadas em múltiplos contextos de doença. Como um nó estrutural e regulatório na biologia dependente de microtúbulos, a tubulina β2C é um alvo útil para dissecar o controlo citoesquelético da divisão celular e do tráfego intracelular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO β2C Tubulin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TUBB4B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TUBB4B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TUBB4B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína β2C Tubulin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TUBB4B para a investigação da sinalização de β2C Tubulin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TUBB4B críticos para a função β2C Tubulin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TUBB4B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo β2C Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo β2C Tubulin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TUBB4B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo β2C Tubulin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR β2C Tubulin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TUBB4B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TUBB4B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.