α_1B-AR CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419020

개요

Adra1b는 마우스 α1B-아드레날린 수용체(α1B-AR)를 암호화하며, 이는 G 단백질 결합 수용체(GPCR)로서 주로 Gq/11과 결합해 phospholipase Cβ(PLCβ) 신호를 활성화합니다. 그 결과 IP3 매개 Ca2+ 방출이 증가하고, diacylglycerol(DAG) 의존적 PKC 활성화가 촉진됩니다. 이러한 경로를 통해 α1B-AR는 평활근 긴장도, 신경전달, 세포 흥분성을 조절하고, 유전자 발현과 적응 반응에 영향을 주는 하위 MAPK/ERK 프로그램도 활성화할 수 있습니다. 신경계 및 심혈관계 맥락에서 아드레날린 수용체 신호는 스트레스 반응 회로 및 자율신경 조절과 교차하며, Adra1b는 고혈압, 신경정신학적 특성, 그리고 질환 모델에서의 아드레날린성 신호 조절 이상과 관련된 표현형과 연결됩니다. α1B-AR 기능을 정밀하게 규명하는 것은 GPCR 신호 편향(signaling bias), 수용체 간 교차 신호(cross-talk), 그리고 칼슘 의존적 전사 조절의 기전을 연구하는 데 도움이 됩니다.

α1B-AR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Adra1b 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Adra1b 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Adra1b의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α1B-AR 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α1B-AR 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Adra1b 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α1B-AR 기능에 중요한 Adra1b 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Adra1b 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α1B-AR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 α1B-AR CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Adra1b 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α1B-AR HDR 플라스미드 (m) 및 α1B-AR HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Adra1b 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Adra1b 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.