α Enolase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420178

개요

Eno1은 해당과정에서 2-포스포글리세르산을 포스포엔올피루브산으로 전환하는 반응을 촉매하는, 보존성이 높은 금속효소인 α-에놀레이스를 암호화하며, 다양한 영양 조건에서 ATP 생성과 탄소 흐름을 뒷받침합니다. 정형적인 대사 기능을 넘어 ENO1은 더 광범위한 대사 재프로그래밍에 관여할 수 있고, 해당계 처리량에 미치는 영향으로 인해 산화환원 균형, 저산소 적응, 세포 스트레스 반응에도 영향을 줄 수 있습니다. ENO1의 발현 및 활성 변화는 증식성 및 염증성 표현형과 연관되어 왔으며, 에너지 대사가 종양유발 신호전달 및 면역세포 기능과 교차하는 맥락에서 자주 연구됩니다. 마우스 시스템에서 Eno1은 세포 성장, 이동, 그리고 미세환경 신호에 대한 반응을 형성하는 해당과정 연계 기전을 규명하기 위한 분석 가능한 핵심 노드로 활용됩니다.

α Enolase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Eno1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Eno1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Eno1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α Enolase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α Enolase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Eno1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α Enolase 기능에 중요한 Eno1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Eno1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α Enolase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 α Enolase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Eno1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α Enolase HDR 플라스미드 (m) 및 α Enolase HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Eno1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Eno1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.