αENaC CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-422825

개요

Scnn1a는 상피 나트륨 채널(ENaC)의 알파 소단위(αENaC)를 암호화하며, 이는 기도, 신장 및 기타 상피에서 정단막(apical membrane)을 통한 아밀로라이드(amiloride) 감수성 Na⁺ 흡수의 속도 제한(rate-limiting) 구성요소입니다. αENaC는 β 및 γ 소단위와 함께 조립되어 상피 횡단(transepithelial) 나트륨 수송을 조절하고, 그 결과 기도 표면 액(airway surface liquid)의 항상성과 신장 나트륨 균형에 영향을 미칩니다. 채널 활성은 단백질분해적 활성화(proteolytic activation)와 유비퀴틴 의존적 턴오버에 의해 조절되며, 특히 Nedd4-2 매개 엔도사이토시스와 나트륨 처리를 미세 조정하는 호르몬성 신호가 중요한 역할을 합니다. ENaC 의존적 이온 수송의 조절 이상은 마우스 모델에서 상피 체액 불균형, 점액 탈수, 염분 민감성 생리 현상을 연구하기 위한 기전적 틀로 널리 활용됩니다.

αENaC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Scnn1a 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Scnn1a 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Scnn1a의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 αENaC 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 αENaC 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Scnn1a 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• αENaC 기능에 중요한 Scnn1a 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Scnn1a 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• αENaC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 αENaC CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Scnn1a 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  αENaC HDR 플라스미드 (m) 및 αENaC HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Scnn1a 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Scnn1a 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.