α-actinin-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-418972

개요

Actn3는 근절(sarcomere)의 액틴 결합 단백질인 α-액티닌-3를 암호화하며, 이 단백질은 빠른 연축(fast-twitch) 골격근 섬유의 Z-디스크에 풍부하게 존재해 수축 동안 가는 필라멘트를 교차 결합하고 안정화합니다. α-액티닌-3는 수축 장치를 조직화하고 근절의 역학에 기여함으로써, 해당과정(glycolytic) 대사 및 기계적 부하에 대한 반응과 연관된 근육 수행 능력 특성과 섬유형(fiber-type) 성질에 영향을 줍니다. α-액티닌-3 기능의 소실은 근력과 지구력 표현형의 변화와 관련되며, 근병증, 근감소(근육 소모), 운동 또는 비사용(disuse)에 대한 적응의 맥락에서 연구되어 왔습니다. 마우스 모델에서 Actn3는 구조적 근원섬유 네트워크와 수축력, 근육 리모델링, 스트레스 반응을 조절하는 경로를 연구할 수 있는 다루기 쉬운 시스템을 제공합니다.

α-actinin-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Actn3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Actn3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Actn3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 α-actinin-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 α-actinin-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Actn3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• α-actinin-3 기능에 중요한 Actn3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Actn3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• α-actinin-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 α-actinin-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Actn3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  α-actinin-3 HDR 플라스미드 (m) 및 α-actinin-3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Actn3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Actn3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.