αA-crystallin CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419820

개요

Cryaa는 눈의 수정체에서 매우 풍부하게 발현되는 소형 열충격 단백질인 αA-크리스탈린을 암호화하며, ATP 비의존적 분자 샤페론으로서 크리스탈린의 용해성을 유지하고 스트레스 상황에서 단백질 응집을 방지하는 기능을 합니다. 수정체의 투명성과 굴절 특성을 형성하는 구조적 역할을 넘어, αA-크리스탈린은 잘못 접힌(미스폴딩된) 표적 단백질과 상호작용하고 산화환원 균형 및 아폽토시스와 연결된 스트레스 반응 네트워크를 조절함으로써 단백질 항상성(프로테오스타시스)에 기여합니다. CRYAA의 발현 또는 기능 변화는 수정체 섬유세포 기능 이상, 단백질 항상성 붕괴, 백내장 관련 표현형과 연관되어 있어, 수정체 발달과 노화 관련 단백질 응집 과정 연구에서 핵심적인 노드로 여겨집니다. 마우스 시스템에서 Cryaa 교란은 수정체 상피세포와 섬유세포에서 샤페론 활성, 세포골격 조직화, 스트레스 내성에 대한 기전 연구를 뒷받침합니다.

αA-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Cryaa 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Cryaa 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Cryaa의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 αA-crystallin 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 αA-crystallin 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Cryaa 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• αA-crystallin 기능에 중요한 Cryaa 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Cryaa 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• αA-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 αA-crystallin CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Cryaa 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  αA-crystallin HDR 플라스미드 (m) 및 αA-crystallin HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Cryaa 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Cryaa 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.