α3C Tubulin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-400020-NIC
- Target species: human
- 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
- α3C Tubulin Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
- 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
- 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
- α3C Tubulin 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 α3C Tubulin 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 TUBA3C을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
주문정보
| 제품명 | 카탈로그 번호 | 단위 | 가격 | 수량 | 관심품목 | |
α3C Tubulin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h) | sc-400020-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
α3C Tubulin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2) | sc-400020-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TUBA3C는 인간 α3C 튜불린을 암호화하며, 이는 미세소관의 핵심 구성 요소로서 세포골격 구조, 세포 내 수송, 그리고 유사분열 동안의 역동적인 방추체 형성을 지지합니다. α3C 튜불린은 다른 α/β-튜불린 아이소폼과의 조절된 중합을 통해 세포 극성, 소포 수송, 염색체 분리 등 미세소관 의존적 과정에 기여하고, 세포주기 진행과 세포골격 재구성을 조절하는 경로들과 통합되어 작동합니다. 미세소관 역학과 튜불린 아이소타입 조성의 변화는 유전체 불안정성과 비정상적 증식과 자주 연관되므로, 튜불린 생물학은 암세포의 행동 및 신경발달 관련 세포 기능 연구 전반에서 폭넓게 중요한 의미를 가집니다. 또한 튜불린 네트워크의 일부로서 TUBA3C는 세포골격 교란이 소기관 위치 결정, 스트레스 반응, 그리고 유사분열 정확도에 어떤 영향을 미치는지 분석하는 데도 유용합니다.
α3C Tubulin 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 TUBA3C 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 TUBA3C 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 TUBA3C의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.
편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, TUBA3C 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.
연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.