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ZUFSP慢病毒激活颗粒(h) | sc-415124-LAC | 200 µl | $455.00 |
ZUFSP(含有 UFM1 特异性肽酶结构域的锌指蛋白)编码一种去泛素化酶,可通过对泛素样修饰物的蛋白酶活性调控蛋白稳态。研究表明,ZUFSP 通过调节复制停滞复制叉及修复中间体上的泛素信号,参与 DNA 损伤应答以及与复制相关的基因组维护。借助其在协调泛素依赖性加工过程中的作用,ZUFSP 可影响染色质相关通路、细胞周期进程以及细胞应激反应。泛素信号失调和基因组稳定性受损是癌症生物学与神经退行性疾病研究中的反复出现的特征,因此 ZUFSP 可作为研究蛋白稳态与 DNA 修复机制的重要节点。
ZUFSP 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ZUFSP 表达。
ZUFSP 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ZUFSP转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ZUFSP表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ZUFSP 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。