ZnT-1 Lentiviral Activation Particles (h): sc-403094-LAC

ヒトのSLC30A1は、細胞膜に局在する亜鉛排出輸送体ZnT-1をコードしており、細胞質内Zn2+濃度を低下させることで亜鉛過負荷から細胞を保護し、金属依存的なシグナル伝達を調節します。亜鉛排出を細胞内恒常性と連動させることにより、ZnT-1は酸化ストレス応答、アポトーシス感受性、メタロチオネインによる緩衝調節に影響し、さらに亜鉛結合タンパク質に依存する転写プログラムにも下流で作用します。亜鉛の取り扱い異常やSLC30A1の発現制御異常は、神経生物学や興奮性に関わる過程に加え、金属不均衡が細胞障害や炎症に寄与するより広い文脈とも関連づけられています。このためZnT-1は、ヒト細胞モデルにおいて亜鉛依存的な膜生理の制御やストレス適応経路を研究するための有用な入口となります。

ZnT-1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なSLC30A1の発現上昇を可能にします。

ZnT-1 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、SLC30A1転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性ZnT-1の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のSLC30A1ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。