Plasmide Double Nickase (h) ZNF384: sc-414941-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) ZNF384 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZNF384 Double Nickase (h) et le plasmide ZNF384 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ZNF384. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ZNF384 Antibody (3545C5a): sc-517543
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) ZNF384 | sc-414941-NIC | 20 µg | $410.00 |
ZNF384 code un facteur de transcription à doigts de zinc qui se lie à l’ADN et module des programmes d’expression génique impliqués dans la croissance cellulaire, la différenciation et la spécification de lignée. Il participe à des réseaux de régulation transcriptionnelle qui s’entrecroisent avec l’organisation de la chromatine et le traitement de l’ARN, influençant de manière contextuelle l’activité des promoteurs et des enhancers. Dans les cellules hématopoïétiques, une dérégulation de ZNF384 a été associée à des fusions géniques récurrentes et à une altération des circuits transcriptionnels pouvant reprogrammer des voies de développement. Ces caractéristiques font de ZNF384 une cible utile pour étudier les réseaux de régulation génique pilotés par des facteurs de transcription et leurs effets sur l’identité cellulaire.
ZNF384 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF384 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF384. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF384. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF384.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.