ZIP14 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-411756-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZIP14O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ZIP14 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ZIP14 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC39A14. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZIP14 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-411756-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZIP14 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-411756-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SLC39A14 codifica o transportador de íons metálicos ZIP14, um membro da família ZIP localizado na membrana plasmática e em compartimentos endossomais, que medeia a captação celular de cátions divalentes, com papéis marcantes na homeostase de zinco e manganês. A atividade do ZIP14 influencia a função de metaloproteínas, as respostas ao estresse oxidativo e a sinalização metabólica, e se conecta a vias inflamatórias em hepatócitos e células imunes, nas quais sinais de citocinas podem modular a expressão do transportador. Alterações no manejo de metais dependente de ZIP14 têm sido associadas a mudanças na depuração sistêmica de manganês e a fenótipos de neurotoxicidade, e também vêm sendo estudadas no contexto do metabolismo hepático e do estresse inflamatório. Como resultado, SLC39A14 é frequentemente usado para investigar a regulação, dependente de metais, da atividade enzimática, de redes de transportadores e de programas de adaptação ao estresse em modelos celulares humanos.
ZIP14 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC39A14 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC39A14. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC39A14. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC39A14 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.