ZFP64 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-410027-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZFP64O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ZFP64 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ZFP64 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ZFP64. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ZFP64 Anticorpo (F-3): sc-374263
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZFP64 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-410027-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZFP64 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-410027-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZFP64 (proteína de dedo de zinco 64) é um putativo fator de transcrição do tipo C2H2 com domínio KRAB, implicado na ligação ao DNA de forma específica à sequência e na regulação epigenética da expressão gênica. Ao recrutar complexos correpressores e enzimas modificadoras de cromatina, acredita-se que o ZFP64 influencie o silenciamento transcricional, a manutenção do estado da cromatina e programas de identidade celular. A regulação alterada de redes de dedos de zinco KRAB tem sido associada à diferenciação desregulada, à estabilidade do genoma e a estados transcricionais oncogênicos, tornando o ZFP64 relevante para estudos de regulação gênica associada ao câncer e de controle do desenvolvimento. Em células humanas, investigar a função do ZFP64 dá suporte à análise mecanística de circuitos transcricionais e de vias dependentes de cromatina.
ZFP64 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ZFP64 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ZFP64. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ZFP64. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ZFP64 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.