ZC3H7A Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-412020

Panoramica

ZC3H7A (zinc finger CCCH-type containing 7A) codifica una proteina legante l’RNA caratterizzata da motivi a “zinc finger” di tipo CCCH e svolge un ruolo nella regolazione post-trascrizionale dell’espressione genica. È stata implicata nel coordinamento della stabilità e della traduzione degli mRNA attraverso interazioni con complessi ribonucleoproteici, contribuendo al corretto controllo dei programmi di espressione genica durante le risposte allo stress cellulare e la proliferazione. ZC3H7A è stata inoltre collegata a reti di interazione virus–ospite, in cui la modulazione del metabolismo dell’RNA può influenzare la segnalazione dell’immunità innata e la replicazione dei patogeni. Un’alterata elaborazione dell’RNA e una traduzione adattativa allo stress sono caratteristiche ricorrenti nel cancro e nei disturbi infiammatori, rendendo ZC3H7A un nodo utile per studi meccanicistici delle vie regolatorie incentrate sull’RNA.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZC3H7A (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ZC3H7A in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ZC3H7A insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ZC3H7A a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZC3H7A.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ZC3H7A per lo studio della segnalazione di ZC3H7A, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni ZC3H7A critici per la funzione di ZC3H7A
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ZC3H7A per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal ZC3H7A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ZC3H7A CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ZC3H7A. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal ZC3H7A Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ZC3H7A (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ZC3H7A per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ZC3H7A definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.