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ZBP1慢病毒激活颗粒(m) | sc-425482-LAC | 200 µl | $455.00 |
小鼠 Zbp1 基因编码 ZBP1(Z-DNA 结合蛋白 1),这是一种胞质内核酸传感器,能够识别 Z 构象核酸,并将病原体相关与损伤相关信号连接到先天免疫的激活。ZBP1 通过与 RIPK1/RIPK3 发生 RHIM 依赖性信号传导,调控炎症相关的转录程序和程序性细胞死亡通路(包括坏死性凋亡),并与干扰素驱动的应答相互衔接。通过这些机制,ZBP1 影响抗病毒限制作用以及细胞存活与炎症性死亡之间的平衡,这些过程与感染生物学和免疫病理密切相关。ZBP1 信号失调已被认为与异常炎症和细胞死亡调控紊乱有关,因此它是利用小鼠模型解析先天免疫回路的一个重要节点。
ZBP1 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Zbp1 表达。
ZBP1 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Zbp1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性ZBP1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Zbp1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。