XPC Double Nickaseプラスミド (h): sc-401499-NIC

XPCは、色素性乾皮症C群タンパク質（XPC）をコードしており、グローバルゲノムヌクレオチド除去修復（GG-NER）における主要な損傷センサーとして、UV誘発性シクロブタン型ピリミジンダイマー（CPD）や嵩高い化学付加体など、DNA二重らせんを歪める損傷を検出します。損傷を認識すると、XPCはTFIIHおよび下流のNER因子のリクルートを調整してDNAの巻き戻し、損傷部位の切除、再合成を開始し、ゲノムの完全性と複製フォークの安定性を維持します。XPCの機能はDNA損傷シグナル伝達や細胞周期チェックポイント制御とも連携しており、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答に影響を与えます。XPCの遺伝的欠損は色素性乾皮症相補群Cの原因となり、突然変異負荷の増加や、UVおよび環境変異原に対する感受性の亢進と関連します。

XPC ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における XPC 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、XPC内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、XPCの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。

編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、XPCが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。