Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
VPS33B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-406200-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VPS33BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VPS33B (h) e o Plasmídeo Double Nickase VPS33B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VPS33B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VPS33B Anticorpo (G-9): sc-398322
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VPS33B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-406200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VPS33B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-406200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VPS33B codifica um componente central da maquinaria de ancoragem (tethering) da classe HOPS/CORVET, que coordena a maturação de endossomos, a docagem de vesículas e a fusão de membranas dependente de SNARE. Por meio da regulação do tráfego endolisossomal e da triagem polarizada, o VPS33B sustenta a entrega adequada de carga aos lisossomos e a vias secretórias especializadas em células diferenciadas. A disfunção do VPS33B tem sido associada a defeitos na polaridade epitelial, na biogênese de grânulos plaquetários e na fisiologia biliar e renal, tornando-o relevante para estudos de fenótipos multissistêmicos de colestase e sangramento. Seu papel no transporte mediado por vesículas também se cruza com vias que controlam a autofagia, a renovação de proteínas de membrana e a homeostase de organelas.
VPS33B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VPS33B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VPS33B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VPS33B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VPS33B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.