Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Vitamin D Receptor/VDR Double Nickaseプラスミド (m): sc-423664-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Vitamin D Receptor/VDR Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Vitamin D Receptor/VDRダブルニカースプラスミド（m）およびVitamin D Receptor/VDRダブルニカースプラスミド（m2）は、Vdrを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Vitamin D Receptor/VDR 抗体 (D-6): sc-13133
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Vitamin D Receptor/VDR Double Nickaseプラスミド (m) | sc-423664-NIC | 20 µg | $410.00 |
Vdr はビタミンD受容体（VDR）をコードしている。VDR はリガンド依存的に活性化される核内受容体で、RXR とヘテロ二量体を形成し、ビタミンD応答配列（VDRE）での転写を制御するとともに、多様な標的座位にわたってクロマチン状態を再編成する。マウス細胞では、VDR シグナルはカルシウムおよびリン酸の恒常性維持と、分化、バリア機能の維持、免疫調節を制御する細胞プログラムを統合し、Wnt/β-カテニン、NF-κB、MAPK に連なる転写ネットワークともクロストークし得る。Vdr 活性は、骨芽細胞および破骨細胞の遺伝子発現、上皮のタイトジャンクションや抗菌応答、ならびに内分泌シグナルに応答する代謝経路に影響する。Vdr 依存的な転写の撹乱は、骨・ミネラル代謝異常、炎症表現型、上皮あるいは代謝の恒常性変化のモデルにおいて広く研究されている。
Vitamin D Receptor/VDR ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Vdr 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Vdr内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Vdrの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Vdrが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。