Vimentin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400035-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VimentinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Vimentin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Vimentin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VIM. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Vimentin Anticorpo (E-5): sc-373717
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Vimentin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400035-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Vimentin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400035-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VIM codifica a vimentina, uma proteína de filamento intermediário do tipo III que confere integridade mecânica e organiza a rede do citoesqueleto em células mesenquimais. A vimentina coordena a forma celular, a adesão e a migração por meio de interações com a actina e os microtúbulos e participa de processos como a transição epitélio-mesênquima, o reparo de feridas e as respostas ao estresse. Sua expressão e fosforilação são reguladas por vias de sinalização que incluem TGF-β, MAPK e Rho/ROCK, conectando o remodelamento dos filamentos de vimentina a mudanças dinâmicas na motilidade. Níveis e organização desregulados de vimentina são frequentemente associados a fenótipos invasivos no câncer e a patologias fibroproliferativas e inflamatórias, tornando-a um marcador importante e um nó mecanístico central na pesquisa sobre citoesqueleto e TEM.
Vimentin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VIM em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VIM. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VIM. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VIM interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.