VEGF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400019-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VEGFO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase VEGF (h) e o Plasmídeo Double Nickase VEGF (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para VEGFA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:VEGF Anticorpo (F-5): sc-365578
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VEGF Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400019-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
VEGF Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400019-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
VEGFA codifica o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), uma citocina secretada e ligante de heparina que regula a proliferação, migração e sobrevivência de células endoteliais. A sinalização de VEGF por meio de VEGFR1/VEGFR2 ativa as vias PI3K–AKT, MAPK/ERK e PLCγ–PKC para coordenar a angiogênese, a permeabilidade vascular e a remodelação tecidual sob hipóxia e estímulos inflamatórios. A expressão ou sinalização desregulada de VEGFA está implicada na neovascularização patológica e no extravasamento vascular observados em microambientes tumorais, respostas a lesão isquêmica e distúrbios vasculares da retina. Como um nó central na sinalização angiogênica, VEGFA é amplamente utilizado para estudar a comunicação endotélio-estroma, a remodelação da matriz extracelular e programas transcricionais induzidos por hipóxia.
VEGF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus VEGFA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de VEGFA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função VEGFA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com VEGFA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.