Vav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-423656

概要

Vav2はRhoファミリーGTPアーゼに対するグアニンヌクレオチド交換因子（GEF）をコードしており、受容体型チロシンキナーゼおよびインテグリンのシグナル伝達をRac1や関連経路の活性化へと結び付けます。アクチン細胞骨格の再構築、細胞接着、膜輸送を協調的に制御することで、VAV2は細胞の移動、伸展、ならびに増殖因子依存的な応答に影響を与えます。マウス系では、細胞骨格ダイナミクスが組織恒常性を形作る免疫・血管生物学に加え、神経系や上皮などの文脈でもVav2が研究されています。VAV2シグナルの破綻は、異常な増殖や浸潤といった表現型に関与するとされ、がん化および炎症性シグナル伝達モデルにおける機序解明の要所（メカニスティック・ノード）として利用されています。

Vav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるVav2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Vav2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Vav2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Vav2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Vav2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Vav2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Vav2の機能に不可欠なVav2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Vav2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Vav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびVav2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Vav2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Vav2 HDRプラスミド（m）および Vav2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはVav2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のVav2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。