Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Vav2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423656
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Vav2 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico Vav2, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Vav2 Antibody (F-6): sc-271442
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Vav2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-423656 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Vav2 codifica un fattore di scambio di nucleotidi della guanina (GEF) per le GTPasi della famiglia Rho, collegando la segnalazione mediata da recettori tirosin-chinasici e integrine all’attivazione di Rac1 e delle vie correlate. Coordinando il rimodellamento del citoscheletro di actina, l’adesione cellulare e il traffico di membrana, VAV2 influenza la migrazione, lo spreading e le risposte dipendenti dai fattori di crescita. Nei modelli murini, Vav2 è studiato in immunologia e biologia vascolare, oltre che in contesti neuronali ed epiteliali in cui la dinamica del citoscheletro contribuisce all’omeostasi tissutale. Una segnalazione VAV2 deregolata è stata implicata in fenotipi di proliferazione e invasione aberranti ed è utilizzata come nodo meccanicistico in modelli di segnalazione oncogenica e infiammatoria.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Vav2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Vav2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Vav2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Vav2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Vav2.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Vav2 per lo studio della segnalazione di Vav2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Vav2 critici per la funzione di Vav2
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Vav2 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal Vav2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Vav2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Vav2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal Vav2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Vav2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Vav2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Vav2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.