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V-ATPase C1双切口酶质粒(h) | sc-402679-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
V-ATPase C1双切口酶质粒(h2) | sc-402679-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ATP6V1C1 编码人类液泡型 H\+-ATP 酶(V-ATPase)V1 结构域的 C1 亚基。该亚基是细胞质侧 ATP 水解模块的核心组成部分,为质子跨内膜系统及质膜的转运提供能量。V-ATPase 驱动的酸化对内体–溶酶体成熟、受体介导的内吞作用、自噬通量以及囊泡运输至关重要,并支持分泌与降解通路中大分子在 pH 依赖条件下的加工处理。通过调控细胞器 pH,并在溶酶体与 mTORC1 等营养感知网络耦联,V-ATPase 活性会影响细胞代谢、应激反应以及膜蛋白周转。V-ATPase 功能失调和细胞区室 pH 稳态改变与多种相关表型有关,包括神经退行性变、肿瘤细胞侵袭/转移潜能,以及抗原加工与免疫信号传导缺陷等,因此 ATP6V1C1 是研究酸化依赖生物学机制的一个有用靶点。
V-ATPase C1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ATP6V1C1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATP6V1C1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ATP6V1C1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ATP6V1C1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。