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UHRF1慢病毒激活颗粒(h) | sc-403851-LAC | 200 µl | $455.00 |
UHRF1(含PHD与RING指结构域的泛素样蛋白1)是一种多结构域的染色质调控因子,在S期将DNA甲基化的维持与对组蛋白修饰的识别相协调。通过结合半甲基化CpG位点并与DNMT1相互作用,UHRF1促进表观遗传标记的传递,从而影响细胞周期进程、复制偶联的染色质组装以及基因组稳定性。UHRF1介导对泛素连接酶活性与组蛋白“读者”蛋白的招募,将DNA甲基化、H3K9甲基化与异染色质组织连接起来,从而塑造转录程序。UHRF1表达失调常与增殖性和转化细胞表型中观察到的表观遗传状态改变相关,因此在研究癌症生物学与发育基因调控中的表观遗传失衡方面具有重要意义。
UHRF1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 UHRF1 表达。
UHRF1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在UHRF1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性UHRF1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 UHRF1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。