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UGT2B28 CRISPR Activationプラスミド (h) | sc-404211-ACT | 20 µg | $397.00 |
UGT2B28 は、内因性代謝産物や生体異物をグルクロン酸抱合(グルクロン酸化)することで、それらの溶解性を高め、細胞からの排出(クリアランス)を促進するヒト UDP-グルクロン酸転移酵素をコードします。この第II相代謝活性は、ステロイド由来基質やその他の脂溶性化合物の利用可能性を調節することにより、解毒およびホルモン恒常性の維持に寄与します。UGT2B28 の発現は組織および状況に依存して制御されており、代謝適応や化学物質曝露に対する応答との関連が示唆されます。UGT2B28 の活性や発現パターンの変化は、薬物代謝、内分泌シグナル伝達、ならびにステロイド処理や解毒経路が攪乱される疾患状態に関する研究で、しばしば評価対象となります。
UGT2B28 CRISPR活性化プラスミド(h)は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性UGT2B28の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。
UGT2B28 CRISPR 活性化プラスミド (h) は、ヒト細胞株における UGT2B28 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異(D10AおよびN863A)を有する、触媒活性のないCas9(dCas9)を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。
標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はUGT2B28転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性UGT2B28の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のUGT2B28遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるUGT2B28依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびUGT2B28発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるUGT2B28経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。