UGT2B17 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h2): sc-405611-KO-2

Panoramica

UGT2B17 codifica una UDP‑glucuronosiltransferasi che catalizza la glucuronidazione di fase II di numerosi substrati endogeni e xenobiotici, aumentandone la solubilità e favorendone l’eliminazione. Questo enzima contribuisce all’omeostasi degli ormoni steroidei e degli acidi biliari e può modulare l’esposizione cellulare a metaboliti bioattivi e potenzialmente tossici attraverso il metabolismo epatico ed extraepatico. Variazioni nell’espressione o nel numero di copie di UGT2B17 sono state associate a differenze interindividuali nella coniugazione degli androgeni e nei fenotipi di metabolismo dei farmaci, con implicazioni per la biologia endocrina e la ricerca farmacogenomica. Nei sistemi sperimentali, l’attività di UGT2B17 si intreccia con le reti di detossificazione e influenza risposte di segnalazione guidate dai metaboliti.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO UGT2B17 (h2) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene UGT2B17 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del UGT2B17 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto UGT2B17 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina UGT2B17.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di UGT2B17 per lo studio della segnalazione di UGT2B17, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni UGT2B17 critici per la funzione di UGT2B17
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di UGT2B17 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal UGT2B17 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal UGT2B17 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus UGT2B17. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal UGT2B17 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR UGT2B17 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia UGT2B17 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio UGT2B17 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.