Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UDP-GlcDH Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-423601
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- UDP-GlcDH Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico UDP-GlcDH, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: UDP-GlcDH Antibody (B-4): sc-137058
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
UDP-GlcDH Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m) | sc-423601 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
Il gene murino **Ugdh** codifica la **UDP-glucosio 6-deidrogenasi** (UDP-GlcDH), un enzima citosolico che ossida l’UDP-glucosio a **acido UDP-glucuronico**, un precursore chiave per la biosintesi di glicosaminoglicani e proteoglicani. Questa reazione sostiene l’assemblaggio e il rimodellamento della matrice extracellulare fornendo substrati per la produzione di **ialuronano** e **solfato di condroitina/dermatan**, influenzando adesione cellulare, migrazione e morfogenesi dei tessuti. L’attività di Ugdh collega inoltre il metabolismo dei carboidrati alle vie di interconversione degli UDP-zuccheri che determinano la composizione del glicocalice e la segnalazione cellula–cellula. Una disponibilità deregolata di acido UDP-glucuronico e la glicosilazione della matrice sono state associate, in modelli sperimentali, ad alterazioni dei programmi di sviluppo, a cambiamenti della matrice simili alla fibrosi e a fenotipi di invasione legati al cancro.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO UDP-GlcDH (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Ugdh in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Ugdh insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Ugdh a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina UDP-GlcDH.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Ugdh per lo studio della segnalazione di UDP-GlcDH, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni Ugdh critici per la funzione di UDP-GlcDH
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Ugdh per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal UDP-GlcDH CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal UDP-GlcDH CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Ugdh. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal UDP-GlcDH Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR UDP-GlcDH (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Ugdh per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Ugdh definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.