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UBC13双切口酶质粒(h) | sc-417204-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UBC13双切口酶质粒(h2) | sc-417204-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
UBE2N 编码 E2 泛素连接酶 UBC13。UBC13 可与 UBE2V1/UBE2V2 形成具有功能的异源二聚体,催化 K63 连接型多聚泛素链的组装。这类非蛋白降解性的泛素信号可协调 DNA 损伤应答、先天免疫与炎症信号传导以及蛋白质稳态;其中一个显著作用是通过对通路衔接蛋白的泛素化,调控 TNFR、TLR/IL-1R 等受体下游的 NF-κB 激活。UBC13 依赖的泛素化还通过在 DNA 损伤位点的泛素信号传递参与基因组维护。UBE2N/UBC13 活性失调与异常免疫信号以及基因组不稳定等表型相关,这些表型与炎症性疾病和肿瘤生物学研究密切相关。
UBC13 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 UBE2N 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对UBE2N内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏UBE2N的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了UBE2N基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。