TSPAN7 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-404065-LAC

TSPAN7 (tetraspanina-7) é uma tetraspanina transmembranar de quatro passagens que organiza microdomínios enriquecidos em tetraspaninas e modula o tráfego de receptores na superfície celular, a adesão e a dinâmica de membrana associada à actina. Em contextos neurais e epiteliais, contribui para a remodelação do citoesqueleto e para a arquitetura sináptica ou juncional por meio de interações com proteínas parceiras de membrana, influenciando nós de sinalização a jusante do agrupamento de receptores e da endocitose. Alterações na expressão ou na função de TSPAN7 têm sido associadas a fenótipos do neurodesenvolvimento e a disfunção sináptica, sustentando sua relevância para estudos de conectividade e plasticidade neuronal. Como as tetraspaninas ajustam a compartimentalização da membrana em vez de atuarem como enzimas clássicas, TSPAN7 é frequentemente investigada por seus efeitos na comunicação cruzada entre vias e em transições de estado celular.

As Partículas de Ativação Lentivirais TSPAN7 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de TSPAN7 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais TSPAN7 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição TSPAN7, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de TSPAN7. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo TSPAN7 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.