Trio Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401231-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TrioO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Trio (h) e o Plasmídeo Double Nickase Trio (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRIO. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Trio Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401231-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Trio Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401231-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O TRIO humano codifica a Trio, um fator de troca de nucleotídeos de guanina (GEF) multidomínio para Rho que ativa GTPases da família Rho, incluindo RAC1 e RHOA, para coordenar a remodelação do citoesqueleto de actina, a polaridade celular, a migração e o crescimento de neuritos. A Trio integra sinais de receptores de membrana e de complexos de adesão em vias que controlam a formação de lamelipódios, a orientação axonal e o desenvolvimento sináptico. Por meio dessas funções, o TRIO contribui para a morfogênese tecidual regulada e para a conectividade do sistema nervoso, e sua desregulação tem sido associada a dinâmicas alteradas do citoesqueleto na biologia do câncer e a distúrbios do neurodesenvolvimento que afetam a conectividade neuronal.
Trio O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRIO em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRIO. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRIO. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRIO interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.