TRIM69 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404906-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TRIM69O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TRIM69 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TRIM69 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TRIM69. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TRIM69 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404906-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRIM69 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404906-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRIM69 codifica uma ligase E3 de ubiquitina da família tripartite motif (TRIM), implicada na regulação dependente de ubiquitina da estabilidade proteica e da sinalização. Como uma proteína do tipo RING–B-box–coiled-coil, o TRIM69 está associado ao controle imune inato de respostas antivirais e à modulação de vias relacionadas ao interferon, influenciando a degradação (turnover) ou a atividade de intermediários-chave de sinalização. Alterações nos programas de ubiquitinação da família TRIM podem remodelar a sinalização inflamatória, as respostas ao estresse e as transições de estado celular, tornando o TRIM69 relevante para estudos mecanísticos de regulação imune e interações hospedeiro–patógeno. A desregulação do circuito de ubiquitina associado ao TRIM69 também tem sido explorada em contextos nos quais proteostase e sinalização imune aberrantes contribuem para fenótipos de doença.
TRIM69 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TRIM69 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TRIM69. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TRIM69. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TRIM69 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.